方法简介
在科研或医药生产中,常常需要获得重组蛋白的全序列信息,以确认重组蛋白是否得到完整表达,以及检测重组蛋白表达过程是否发生某些断裂。常规的蛋白样品鉴定一般只采用Trypsin对蛋白进行酶切,鉴定到的肽段覆盖率较低。为了得到靶蛋白的全部序列信息,我们选用3个蛋白酶(Trypsin、Chymotrypsin、Glu-C)分别对靶蛋白进行酶切和鉴定,将查库结果进行整合,最终完成蛋白序列全长的测定。
样品要求
关于样品:可以提供蛋白冻干粉或蛋白质溶液;至少需要20ug的蛋白质,纯度>90% ;含盐量:挥发性无机盐<20mM,不挥发性无机盐<5mM;蛋白溶液避免SDS等变性剂,表面活性剂,不含tris缓冲体系。
样品运输:请使用足量的干冰运输,并尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。
案例分析